Анализ кала методом пцр на гельминты

Анализ кала на ПЦР

Анализ кала методом пцр на гельминты

Дата обновления: 27.01.2020

По анализу кала можно заподозрить множество патологий, связанных с пищеварительной системой и не только. Опираясь на полученные данные, врач назначает соответствующее лечение. Анализ кала на ПЦР один из наиболее информативных способов получения информации о состоянии здоровья пациента.

Анализ кала на ПЦР позволяет определить с высокой степенью точности большую часть микроорганизмов, обитающих в кишечнике, как патогенных, так и условно-патогенных. Этот отдел пищеварительной системы наиболее заселен бактериями, вирусами, простейшими.

Показания к анализу

Причин, по которым может потребоваться анализ кала на ПЦР достаточно много. Это и некоторые виды наследственных заболеваний, и наличие кишечных инфекций и последствия приема некоторых медикаментозных средств, соблюдение диет, отрицательно влияющих на организм, наличие вредных привычек.

Все эти факторы создают условия для возникновения различных видов заболевания кишечника, в том числе и сопровождающихся нарушением микрофлоры. В этом случае полезные микроорганизмы вытесняются заменяющей их патогенной флорой.

Данный тип обследования врачи назначают пациентам, которые жалуются на:

  • Приступы тошноты.
  • Сильные боли в области живота.
  • Отрыжка.
  • Диарея.
  • Частые запоры.
  • Метеоризм.

Помимо этого, может повышаться температура, появляться сыпь на кожных покровах, или будет изменяться оттенок кожи и склер глазных яблок.

Все эти симптомы являются общими для многих кишечных заболеваний. Например, боли в животе при разных кишечных заболеваниях всегда присутствуют, но носят различный характер, локализацию и время возникновения, поэтому без анализа кала не обойтись при постановке диагноза, иначе вероятность ошибки будет высока.

Подготовка к процедуре

К сдаче кала необходимо соответствующим образом подготовиться.

  • За семь дней до исследования необходимо прекратить прием всех медикаментов, особенно тех, которые влияют на перистальтику кишечника.
  • Накануне сбора материала нельзя использовать ректальные свечи и ставить клизму.
  • Полностью исключаются из рациона питания продукты, окрашивающие кал.
  • Биологический материал собирают в стерильный контейнер.
  • На образец для исследования не должна попасть моча и выделяемое из половых органов.

Наиболее информативными будут те фрагменты кала где будут посторонние включения, имеется кровь и слизь.

Причины ложных результатов

Не всегда полученные результаты будут отражать истинную картину процессов, происходящих в кишечнике. Это происходит в следующих случаях:

  • При нарушении правил сбора материала, особенно если пациент продолжал принимать антибиотики и противовоспалительные препараты до момента сдачи кала.
  • При несоблюдении требований к употребляемым продуктам.
  • Результат исследования будет ложноположительным в том случае, если инфекции нет, а полученные данные свидетельствуют об обратном. Такое становится возможным, если в кишечнике имеются микроорганизмы, находящиеся в близком родстве с возбудителем.

Положительное значение может быть получено по вине лаборанта, в материал попадет ДНК микроорганизмов, оставшееся после предыдущего материала.

Изменение полученных данных может произойти, если будут использованы просроченные реагенты.

Как проводится анализ

Используя метод ПЦР, в кале можно выявить хеликобактер пилори, лямблии, присутствие простейших, грибов и глистов. Данный способ выявления инфекций существует не так давно, около тридцати лет. В его основу положена способность обнаружения в материале участков ДНК возбудителей.

Для этого структуры образца многократно увеличивают с помощью создания специальных условий, при которых из одной молекулы ДНК получается две. На образование одной цепочки уходит до трех минут. После того как образуется достаточно число молекул, проводят их визуальное опознание.

Нормы и расшифровка результата

В ходе исследования проводится прямое определение возбудителя, в то время как другие виды диагностики имеют дело лишь с продуктами их жизнедеятельности, которые только косвенно свидетельствуют о присутствии патогенного микроорганизма.

ПЦР анализ имеет высокий уровень специфичности, так как каждый организм имеет ДНК, свойственное только его виду. Исследование обладает высокой степенью чувствительности, так как позволяет найти даже единичные клетки возбудителя в материале.

Так как РНК И ДНК у организмов состоят из одинаковых наборов белков, то подобный принцип исследования универсален и обнаруживает практически все виды возбудителей.

С помощью ПЦР метода удается определить микроорганизмы, которые не поддаются культивации и поэтому не идентифицируются с помощью других, уже ставших традиционными методов.

У этого метода существуют и недостатки. С его помощью невозможно изучать возбудителей, чьё ДНК еще не было обнаружено и исследовано. Так как возбудители под действием различных факторов часто мутируют, результат анализ становится ложноположительным.

Данная статья размещена исключительно с целью ознакомления в познавательных целях и не является научным материалом или профессиональным медицинским советом. За диагностикой и лечением обратитесь к врачу.

Остались вопросы?

Введите ваши данные, и наши специалисты свяжутся с Вами, и бесплатно проконсультируют по волнующим вас вопросам.

Источник: //www.medcentrservis.ru/analyses/analiz-kala-na-ptsr/

Лабораторная диагностика гельминтозов и паразитозов

Анализ кала методом пцр на гельминты

[40-169] Лабораторная диагностика гельминтозов и паразитозов

6190 руб.

Комплексное лабораторное обследование для выявления основных гельминтозов и протозойных инфекций человека, включающее общеклинические и специфические тесты.

Синонимы русские

Анализы для диагностики гельминтозов и протозойных инфекций.

Синонимы английские

Laboratory diagnosis of protozoal and helminthic infections; CBC, Stool Ova and Parasites test, Cellulose tape test, Protozoal and Helminthic Serology.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, кал, отпечаток с перианальной области.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
  • Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
  • Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
  • Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
  • Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.
  • Сбор биоматериала на исследование проводится только утром (до 10:00), до дефекации. Накануне взятия биоматериала не проводить туалет кожных покровов в области ануса и ягодиц.

Общая информация об исследовании

Гельминтозы и протозойные инфекции наблюдаются повсеместно и особенно распространены среди детей и людей, по роду деятельности контактирующих с домашними и дикими животными. Как правило, инфицирование человека является одним из этапов развития гельминтов или простейших.

Многие из паразитов имеют фекально-оральный механизм передачи инфекции и по крайней мере на одном этапе жизненного цикла поражают различные отделы пищеварительного тракта.

Несмотря на то что некоторые гельминтозы и паразитозы человека имеют специфические клинические признаки, в целом дифференцировать эти заболевания на основании клинической картины очень сложно. Основную роль в диагностике этих заболеваний играют лабораторные тесты.

С учетом того, что у одного и того же человека может наблюдаться сочетание нескольких гельминтозов и паразитозов, рекомендуется выполнение сразу нескольких тестов или, что более удобно для врача и пациента, комплексного анализа на распространенные гельминтозы и паразитозы.

Комплексное лабораторное обследование включает общеклинические и специфические анализы на самые распространенные и важные в клиническом плане гельминтозы и протозойные инфекции. Общеклинические тесты: общий анализ крови, лейкоцитарная формула, анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших.

Общий анализ крови и лейкоцитарная формула используются для того, чтобы определить, является ли гельминтоз или паразитоз инвазивным, и также позволяет выявить возможные осложнения, связанные с инфекцией (анемию). Об инвазивности гельминтозов и паразитозов свидетельствует эозинофилия.

 Она характерна для амебиаза, эхинококкоза, описторхоза, токсокароза, трихинеллеза и аскаридоза (в фазу миграции личинок). Эозинофилия не характерна для кишечного аскаридоза, энтеробиоза и лямблиоза. Любая длительно текущая инфекция может приводить к развитию анемии (анемии хронического заболевания).

Гельминтозы и паразитозы, протекающие с изъязвлением слизистой оболочки пищеварительного тракта (например, амебиаз), приводят к развитию железодефицитной анемии.

Анализ кала на яйца гельминтов и анализ кала на цисты простейших включают макроскопическую оценку кала (цвет, консистенция, наличие крови, избытка слизи, макроскопически определяемых паразитов), микроскопию нативного образца кала (наличие цист простейших – трофозоитов, личинок и взрослых особей гельминтов) и микроскопию окрашенного мазка кала (наличие цист и трофозоитов). Анализ кала на яйца гельминтов позволяет выявить большинство кишечных нематод, цестод и трематод. Анализ кала на цисты простейших позволяет выявить Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Balantidium coli и других простейших. Учитывая, что поступление яиц гельминтов или цист простейших в кал может носить непостоянный характер, однократное исследование кала малоинформативно – рекомендуется исследование трех образцов кала. Следует учитывать, что при некоторых гельминтозах (например, описторхоз) появление яиц в кале начинается только через 2-4 недели после возникновения симптомов заболевания. Отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.

К специфическим тестам для диагностики гельминтозов и паразитозов относятся серологические тесты и анализ на энтеробоз.

Echinococcus, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю эхинококкоза (Echinococcus granulosus или Echinococcus multilocularis). Чувствительность серологических тестов в отношении E. granulosus при поражении печени (самая частая локализация) составляет около 80 %, при поражении других органов (легкие, головной мозг, кости скелета) – несколько ниже.

Opistorchis, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю описторхоза (Opistorchis felineus или Opistorchis viverrini). Из-за невысокой специфичности серологические тесты являются дополнительным способом диагностики описторхоза (главный тест – анализ кала на яйца гельминта).

Toxocara, IgG, титр – количественное определение специфических антител IgG к возбудителю токсокароза (Тохосаra canis).

Серологические тесты обладают достаточно высокой чувствительностью (78 %) и специфичностью (92 %) и могут служить хорошим дополнением или даже альтернативой “золотому стандарту” диагностики данного заболевания – микроскопическому исследованию биопсии ткани, содержащей личинки гельминта (частая локализация – печень и легкие), учитывая, что многие пациенты с токсокарозом – маленькие дети.

Учитывая системный характер таких инфекций, как эхинококкоз, описторхоз и токсокароз, при подозрении на эти заболевания проводят дополнительные обследования, в том числе оценку функции печени.

Trichinella, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю трихинеллеза (Trichinella spiralis и родственные виды). Серологические тесты становятся положительными через 3 недели после инфицирования.

Учитывая, что личинки гельминта поражают мышечную ткань, при данном заболевании также могут быть повышены следующие клинико-лабораторные маркеры: креатинкиназа (КК), лактатдегидрогеназа (ЛДГ) и аспартатаминотрансфераза (АСТ).

Ascaris lumbricoides, IgG – определение специфических антител IgG к возбудителю аскаридоза. Аскаридоз – это самый распространенный гельминтоз человека. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики аскаридоза (главный тест – выявление взрослых особей в области рта и ануса, а также анализ кала на яйца гельминта).

Giardia lamblia, антитела – определение специфических антител к возбудителю лямблиоза. Серологические тесты являются дополнительным способом диагностики лямблиоза (главный тест – анализ кала на цисты паразита). Серологический тест становится отрицательным через 1 год после перенесенной инфекции. Также может быть использован тест на антиген G. lamblia в кале.

Энтеробиоз – распространенный гельминтоз, вызываемый Enterobius vermicularis(острица). Яйца остриц не выделяются с калом, поэтому микроскопическое или любые другие исследования кала не применяются. Лабораторная диагностика энтеробиоза осуществляется с помощью специального метода – микроскопического исследования мазков-отпечатков с кожи перианальной области.

Микроскопическое исследование позволяет произвести дифференциальную диагностику энтеробиоза с аскаридозом, а также другими неинфекционными заболеваниями, сопровождающимися зудом перианальной области (контактным дерматитом, сахарным диабетом).

Учитывая повышенную активность самки в ночные часы, оптимально производить мазок-отпечаток с утра, до совершения утреннего туалета.

Комбинация общеклинических и специфических тестов позволяет достичь наибольшей точности при диагностике гельминтозов и паразитозов.

При эффективном лечении изменения, выявленные в общеклинических тестах, нормализуются, а яйца/личинки/взрослые особи гельминтов или цисты простейших перестают определяться, но серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.

Для чего используется исследование?

  • Для диагностики кишечных гельминтозов и протозойных инфекций.

Когда назначается исследование?

  • При обследовании детей и людей из группы риска заражения гельминтами и простейшими (ветеринары, фермеры, работники, занятые в санитарно-гигиентической сфере);
  • при наличии признаков глистной инвазии или протозойной инфекции: хронической диареи, мальабсорбции, тошноты, потери веса, а также признаков реакции гиперчувствительности (крапивницы и других сыпей);
  • при оформлении ребенка в детский сад, лагерь, бассейн, при госпитализации.

Что означают результаты?

Референсные значения

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

В норме яйца, личинки и взрослые особи гельминтов, цисты и вегетативные формы простейших в кале отсутствуют. Их обнаружение свидетельствует о текущей инфекции.

Серологические тесты могут оставаться положительными в течение некоторого времени даже при эффективном лечении.

Что может влиять на результат?

  • Время, прошедшее с момента заражения: яйца гельминтов и цисты простейших могут быть обнаружены через 2-4 недели и позже после заражения.
  • Характер и скорость образования яиц гельминтов и цист простейших: часто наблюдается прерывистый характер их поступления в кал, что может привести к получению ложноотрицательного результата и обуславливает необходимость исследования трех, а не одного образца кала.

Важные замечания

  • Для получения точного результата необходимо следовать рекомендациям по подготовке к тесту;
  • результат комплексного анализа следует интерпретировать с учетом анамнестических, клинических и инструментальных данных;
  • отрицательный результат исследований не позволяет полностью исключить наличие гельминтоза или паразитоза.

Также рекомендуется

[06-022] Креатинкиназа общая [06-025] Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) общая [06-010] Аспартатаминотрансфераза (АСТ) [06-003] Аланинаминотрансфераза (АЛТ)

Кто назначает исследование?

Врач общей  практики, педиатр, инфекционист.

Литература

  • Kucik CJ, Martin GL, Sortor BV. Common intestinal parasites. Am Fam Physician. 2004 Mar 1;69(5):1161-8.
  • McPhee S.J., Papadakis M. CURRENT Medical Diagnosis and Treatment / S. J. McPhee, M. Papadakis; 49 ed. – McGraw-Hill Medical, 2009.

Источник: //helix.ru/kb/item/40-169

Пцр диагностика кала на гельминты

Анализ кала методом пцр на гельминты

Для того чтобы понять, что такое ПЦР кала, следует знать, что же такое кал. Кал — это совокупность отходов жизнедеятельности и непереваренных остатков пищи человека, которые выводятся наружу из организма человека через кишечник путем испражнения.

Нормальное протекание данного процесса (выведения кала из организма) крайне важно, так как эти экскременты — не что иное, как отходы, засоряющие организм и мешающие ему нормально функционировать при их скоплении.

Кроме того, по данному виду отходов можно многое узнать о самом организме.

Например, по анализам кала можно узнать о пищеварительном тракте, о желчевыводящей системе, о бактериальном балансе толстой кишки, о наличии скрытых кровотечений из желудочно-кишечного тракта, а также выявить наличие нежелательных микроорганизмов в кишечнике.

Анализов кала довольно много, и каждый из них имеет свои цели назначения и несет свою информацию.

Например, с помощью копрограммы можно проанализировать работу пищеварительной системы, то есть выявить ряд заболеваний желудка, кишечника, поджелудочной железы, желчного пузыря и печени.

Тест на скрытую кровь показывает наличие скрытого кровотечения из различных отделов желудочно-кишечного тракта. Такой анализ проводят при подозрении таких заболеваний, как язва желудка или двенадцатиперстной кишки, а также опухолевые заболевания.

ПЦР диагностика кала применяется для диагностики инфекционных заболеваний (например, лямблиоз), в том числе и инфекций, которые передаются половым путем.

То есть с помощью ПЦР кал человека может донести важную информацию о состоянии других органов.

Преимущества у данного анализа следующие:

  1. Прямое определение наличия возбудителей (если другие анализы выявляют только отходы жизнедеятельности паразитов, то данный метод указывает на фрагмент ДНК последних).
  2. Высокая специфичность (при данном анализе выявляется уникальный, характерный только для данного возбудителя фрагмент ДНК).
  3. Высокая чувствительность (ПЦР выявляет даже наличие единичной клетки вируса).
  4. Высокая скорость получения результата (результат данного исследования можно получить уже через 4-5 часов).

Полимеразная цепная реакция кала позволяет выявить целый ряд заболеваний, среди них СПИД, гепатиты, сифилис, хламидиоз, лямблиоз и др. Лямблиоз подразумевает наличие таких паразитов, как лямблии, широко распространен. Им болеют даже дети.

Это обусловлено тем, что дети редко следят за гигиеной и часто, контактируя между собой, несколько небрезгливы. Причем это такое заболевание, при котором человек может даже и не знать, что болеет. То есть эти паразиты, находясь в организме человека, могут его абсолютно не беспокоить.

И в настоящее время это считается нормальным. Данное состояние не лечат, пока оно спит. Но как только оно просыпается и дает о себе знать неприятными симптомами, необходимо обратиться к специалисту. На самом деле, даже если лямблии и не беспокоят, но каким-то случайным образом выявлены, лучше пройти лечение.

А детям, которые часто находятся в коллективе, ПЦР кала на лямблию можно сдавать в регулярном порядке.

Если специалист назначил данный анализ, то перед его сдачей (за несколько дней) необходимо прекратить принимать слабительные препараты, ректальные свечи, масла, а также препараты, которые влияют на окраску кала (например, препараты с богатым содержанием железа).

Для сбора материала используют только специальные стерильные контейнеры с палочкой. Ополаскивать или протирать чем-либо их не рекомендуется. При сборе экскрементов надо быть предельно аккуратным, чтобы не задеть внутреннюю часть контейнера рукой.

Для сдачи анализа на ПЦР в калах не должна содержаться моча. Использование вспомогательных средств (например, клизмы) при испражнении для сдачи материала запрещено.

Кал собирается в день сдачи, для чего должен быть собран в контейнер с помощью специально предназначенной для этого палочкой. Контейнер необходимо заполнить не более чем на 1/3.

Вот такие простые правила необходимо соблюдать при сборе материала для сдачи анализа ПЦР кала. Казалось бы, ничего сложного, но нарушение хотя бы одного из пунктов может исказить результат исследования, что может привести к лечению несуществующих паразитов.

источник

Криптоспоридии (Cryptosporidium parvum) — это одноклеточные микроорганизмы, вызывающие такое заболевание, как криптоспоридиоз, поражающее пищеварительную и дыхательную системы человека. Источником инфекции чаще всего является вода, заражённая криптоспоридиями, а также инфицированные люди и животные.

Инкубационный период составляет 4 — 14 дней.

Основным симптомом криптоспоридиоза является сильная диарея, вызывающая обезвоживание организма. Для данного заболевания характерен частый водянистый стул (до 20 раз в сутки) с неприятным запахом, без примесей крови.

К диарее могут присоединяться тошнота, рвота, головные боли, слабость. У людей с нормальным иммунитетом эти симптомы проходят самостоятельно в течение двух недель. У пациентов с иммунодефицитом (особенно у ВИЧ-инфицированных) диарея может продолжаться несколько месяцев, приводя к угрожающему жизни обезвоживанию.

Возможные другие названия: Криптоспоридии, криптоспоридиоз

Описание метода: Криптоспоридии (Cryptosporidum parvum) одноклеточные паразиты типа Sporozoa (споровики), вызывающие заболевание криптоспоридиоз. Заражение человека происходит алиментарным путем, чаще всего через воду и продукты питания.

Попав в организм человека, паразит направляется к эпителиальным клеткам кишечника и поражает желудочно-кишечный тракт. Заболевание проявляется как острая кратковременная инфекция, возможно бессимптомное течение.

У людей с выраженным иммунодефицитом криптоспоридиоз протекает тяжело, часто с летальным исходом.

Материал: Кал, мазок (прямая кишка)

• Редкие боли в области желудка

У иммунокомпрометированных пациентов:

• Возникновение хронической диареи (более двух месяцев)

• В редких случаях холероподобная симптоматика

В норме данный микроорганизм должен отсутствовать

Что еще сдают с этим анализом:

— ПЦР Ascaris lumbricoides 02-04-09

Источник: //nstone51.ru/kal/ptsr-diagnostika-kala-na-gelminty/

ВрачЗдесь
Добавить комментарий